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RNA聚合酶III（Pol III）负责转录小的非编码RNA，包括tRNA，5S rRNA，U6 snRNA，SRP RNA和其他稳定的短RNA，例如核糖核酸酶P RNA。
真核生物中Regulation of gene expression是通过几种控制水平的相互作用实现的，这些控制在局部起作用以响应特定的细胞需要打开或关闭单个基因，并在全局范围内维持染色质范围的基因表达模式，从而塑造细胞身份。 由于真核基因组包裹在组蛋白周围形成核小体和高阶染色质结构，转录机制的底物通常被部分隐藏。 没有调节蛋白，许多基因以低水平表达或根本不表达。 转录需要置换定位的核小体，以使转录机制能够获得DNA。
转录中的所有步骤都受到一定程度的调节。 特别是转录起始是调节基因表达的主要水平。 针对细胞的能量成本而言，针对限速初始步骤是最有效的。 转录起始受DNA调节区内顺式作用元件（增强子，沉默子，隔离子）和作为激活剂或阻遏物的序列特异性反式作用因子的调节。 通过靶向延长聚合酶的运动，也可以在起始后调节基因转录。
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